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核酸提取純化系統實際應用時的常見問題分析

釋出時間◕·✘:2022-10-25      點選次數◕·✘:351
   核酸提取純化系統是透過細胞裂解液裂解樣本✘↟↟✘◕,從樣本中游離出來的核酸分子被特異的吸附到磁性顆粒表面✘↟↟✘◕,而蛋白質等雜質不被吸附而留在溶液中✘↟↟✘◕,在磁場作用下✘↟↟✘◕,使磁性顆粒與液體分開✘↟↟✘◕,回收顆粒(即磁珠-核酸混合物)✘↟↟✘◕,再用洗脫液洗脫即可以得到高純度的核酸·↟。
  核酸提取純化系統的實驗重複性✘│、穩定性好✘↟↟✘◕,操作簡單✘↟↟✘◕,觸屏視覺化介面·↟。體積小巧✘│、運輸方便✘│、佔據實驗空間小·↟。專業的結構設計✘↟↟✘◕,儀器執行接近靜音·↟。操作軟體設計通用性強✘↟↟✘◕,可適合各廠家提取試劑盒·↟。內建電池✘↟↟✘◕,在突然斷電情況下仍然可以繼續執行·↟。一次性磁棒套✘│、紫外滅菌燈及排氣系統(HEPA)的使用✘↟↟✘◕,可有效保障環境和人員的生物安全✘↟↟✘◕,並且可有效截留氣溶膠✘↟↟✘◕,避免不同批次試劑間的交叉汙染·↟。
  核酸提取純化系統實際應用時的常見問題分析◕·✘:
  一✘│、提取核酸得率較低
  1.樣品量與試劑的配比要控制在一定範圍✘↟↟✘◕,避免超過裂解能力·↟。
  2.破碎研磨的步驟處理細節很重要✘↟↟✘◕,一定要充分研磨✘↟↟✘◕,這是核酸提取的條件·↟。
  3.在洗脫的步驟✘↟↟✘◕,使用足量的洗脫液洗脫並充分混勻✘↟↟✘◕,避免有團塊殘存·↟。
  4.實驗耗材要匹配✘↟↟✘◕,如不同的吸附柱或磁珠的核酸吸附能力不同✘↟↟✘◕,也會影響核酸的得率·↟。
  二✘│、提取核酸出現降解
  1.提取的樣品量要符合試劑的配比✘↟↟✘◕,儘量控制樣品量達到合適比例·↟。
  2.每個步驟都要注意充分的混合均勻✘↟↟✘◕,避免團塊的殘留影響實驗結果·↟。
  3.在洗脫時✘↟↟✘◕,時間過長或者溫度過高✘↟↟✘◕,核酸有可能會降解·↟。
  4.樣本切記不可反覆凍融✘↟↟✘◕,提取的樣本要注意在合適的溫度儲存✘↟↟✘◕,長期儲存儘量-80℃·↟。
  三✘│、提取核酸純度不高
  1.樣本量和裂解液等試劑的配比要儘量控制到合適的範圍·↟。
  2.混合均勻以確保裂解充分和沒有團塊殘留·↟。
  3.晾乾的步驟要充分✘↟↟✘◕,否則可能會導致醇類等雜質的殘留·↟。
  4.磁棒振盪幅度太小或混合時間太短✘↟↟✘◕,磁珠上有雜質殘留會影響磁珠吸附核酸的能力·↟。
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